CDK4和CDK6在苏氨酸残基T172和T177上的T环磷酸化是CDK4和CDK6的复合物的催化活性（CCND1，CCND2和CCND3）（CCND1，CCND2，Strom和Sherr 1994）所必需的，Merzel-Schachter等。2013年，Bisteau等人2013）。这些磷酸化取决于先前的D型Cyclin结合（Kato，Matsuoka，Polyak等，1994，Bockstaele等，2006）。CCK4 / 6的关联不排除T环磷酸化：CCND复合物至CCND复合物对CIP / KIP Cyclin依赖性激酶（CDK）抑制剂CDKN1A（P21CIP）和CDKN1B（P27KIP1），然而，CDKN1b的高表达水平降低了T172磷酸化CDK4（Kato，Matsuoka，Polyak等，1994，Bockstaele等。2006，Ray等人2009）。CDKN1B（P27KIP1）酪氨酸残基Y89的磷酸化结合CDK4：CCND复合物被发现CCND复合物在体外CAK复合物（CDK7，CCNH和MAT1）的CDK4磷酸化，但不适用于S的CSK1的磷酸化。Pombe（Ray等人2009）。CDK4和CDK6的T环磷酸化是差分调节的（Bockstaele等，2009）。特别是，CDK4的T172磷酸化受丝肠和抗髓型途径（Paternot和Roger 2009）严格控制，并且可以在细胞周期蛋白D1：CDK4和Cyclin D3：CDK4络合物中进行差异调节（通过Paternot等，2010）。CDK4的T环T172磷酸化基质与其他细胞周期CDK不同，包括CDK6，通过进化地保守的相邻的脯氨酸残基（P173）。该脯氨酸残留物是在体内T172 CDK4的磷酸化而需要的，但不需要CAK的体外磷酸化。 This indicates that CDK4 might be activated by other proline-directed kinases in vivo (Bockstaele et al. 2009). Nevertheless, in HCT116 colon carcinoma cell line, the activity of CDK7 is required for the T172 phosphorylation of CDK4 and the activity of CDK4/6:CCND complexes (Merzel Schachter et al. 2013, Bisteau et al. 2013). T170 phosphorylation of CDK7 facilitates the activity of CAK on CDK4 (Merzel Schachter et al. 2013). However, CDK7 inhibition in HCT116 cells does not preclude the T172 phosphorylation of CDK4:CCND complexes that are not associated with CDKN1A (Bisteau et al. 2013).
CDK4 / 6和CDK2丝氨酸残基S130在丝氨酸残基S130的CDKN1A的磷酸化被涉及CaK介导的CDKN1a结合CDK4的磷酸化的预先确定（Bisteau等，2013）。参与T172的CDK4磷酸化的其他激酶仍然被定义（Bisteau等，Bisteau等，2013年，由Paternot等，2010年审查。