编码转移RNA (tRNAs)的基因在细胞核中由RNA聚合酶III转录，在线粒体中由线粒体RNA聚合酶转录。
在细胞核转录反应中产生前tRNAs (pre-tRNAs)，它有额外的5'前导，3'拖车，在某些情况下，内含子被酶和酶复合物除去:核糖核酸酶P劈开5 '领袖,核糖核酸酶Z劈开3的预告片,TRNT1聚合CCA到生成的3 '端,TSEN复杂劈开两端的基因内区,和tRNA连接酶复杂结扎的外显子(综述Rossmanith et al . 1995年,Phizicky 2010年料斗,铃木等。2011年,雅培等。2014年,李和梅森2014)。tRNAs内的核苷酸会经过进一步的化学修饰，如通过不同的酶进行甲基化和脱氨(Helm and Alfonzo 2014, Boschi-Muller and motor2013)。每个tRNA的事件顺序尚不完全清楚，由于tRNA的逆行(从细胞质到细胞核)运输，对整个过程的理解变得复杂。
在线粒体基质中转录产生rna前体,H股成绩单和L链记录,由线粒体核糖核酸酶裂解P(一种完全蛋白质的复杂),ELAC2,和其他核酸酶产量12 s rRNA, 16 s rRNA, mrna, pre-tRNAs缺乏3 ' CCA序列(综述Van高级et al . 2015年)。TRNT1将一个未模板化的CCA序列聚合到trna前端的3'端，并对trna中的几个核苷酸进行化学修饰。