MASTL也被称为长城激酶(GWL)，其活性对有丝分裂的进入和进展是必要的。在有丝分裂进入过程中，MASTL通过几个关键残基的磷酸化而被激活。丝氨酸残基S875 (Xenopus中的S883)的磷酸化可能通过自磷酸化(Blake-Hodek et al. 2012)显得至关重要(Vigneron et al. 2011)。其他几个位点，包括假定的CDK1靶点T194、T207和T741，有助于MASTL的完全激活(Yu et al. 2006, Blake-Hodek et al. 2012)。其他激酶，如PLK1 (Vigneron et al. 2011)和其他MASTL磷酸化位点可能也具有重要的功能(Yu et al. 2006, Blake-Hodek et al. 2012)。

激活的MASTL分别使丝氨酸S62和S67上的ARPP19和ENSA磷酸化，使它们能够结合并抑制与调控亚基PPP2R2D (B55-delta)复合物的PP2A的磷酸酶活性。ARPP19或ENSA抑制PP2A-PPP2R2D活性可阻止CDK1靶点的去磷酸化，从而允许有丝分裂的进入和维持(Mochida等，2010,Gharbi-Ayachi等，2010,Burgess等，2010)。